English
Español
Português
Русский
العربية
한국어
日本語
Français
Deutsch
เกี่ยวกับการตรวจหากรดนิวคลีอิก คุณรู้มากแค่ไหน?
นับตั้งแต่เกิดการระบาดของ COVID-19 การทดสอบกรดนิวคลีอิกก็กลายเป็นคำที่มีความถี่สูง การทดสอบกรดนิวคลีอิกเชิงบวกเป็นเกณฑ์สำคัญในการวินิจฉัยโรคโควิด-19 WST-8 ได้กลายเป็น API สำหรับชุดทดสอบกรดนิวคลีอิก คุณมีความรู้เกี่ยวกับการทดสอบกรดนิวคลีอิกมากแค่ไหน? หลักการตรวจหากรดนิวคลีอิกคืออะไร? เหตุใดการทดสอบกรดนิวคลีอิกจึงมีผลลบลวง? นอกจากการทดสอบกรดนิวคลีอิกแล้ว มีเทคโนโลยีอะไรอีกบ้างที่สามารถตรวจจับโคโรนาไวรัสสายพันธุ์ใหม่ได้?
ไขปริศนาหลักการตรวจหากรดนิวคลีอิกของไวรัสโคโรนาสายพันธุ์ใหม่
จริงๆ แล้วการทดสอบกรดนิวคลีอิกเป็นการตรวจจับว่ามีกรดนิวคลีอิก (RNA) ของไวรัสโคโรนาสายพันธุ์ใหม่อยู่ในร่างกายของผู้ที่ถูกทดสอบหรือไม่ กรดนิวคลีอิกของไวรัสแต่ละตัวประกอบด้วยไรโบนิวคลีโอไทด์ และจำนวนและลำดับของไรโบนิวคลีโอไทด์ที่มีอยู่ในไวรัสต่างกันจะแตกต่างกัน ทำให้ไวรัสแต่ละตัวมีความเฉพาะเจาะจง
กรดนิวคลีอิกของไวรัสโคโรนาสายพันธุ์ใหม่ก็มีลักษณะเฉพาะเช่นกัน และการตรวจหากรดนิวคลีอิกเป็นการตรวจหากรดนิวคลีอิกของไวรัสโคโรนาสายพันธุ์ใหม่โดยเฉพาะ ก่อนการทดสอบกรดนิวคลีอิก จำเป็นต้องเก็บตัวอย่างเสมหะ ผ้าเช็ดลำคอ น้ำล้างหลอดลมและหลอดลม เลือด ฯลฯ ของตัวอย่าง และจากการทดสอบตัวอย่างเหล่านี้ จะพบว่าระบบทางเดินหายใจของตัวอย่างติดเชื้อแบคทีเรีย การตรวจหากรดนิวคลีอิกของไวรัสโคโรนาสายพันธุ์ใหม่มักใช้ในการตรวจหาตัวอย่างจากไม้กวาดในลำคอ ตัวอย่างจะถูกแยกและทำให้บริสุทธิ์ และกรดนิวคลีอิกของไวรัสโคโรนาสายพันธุ์ใหม่ที่เป็นไปได้จะถูกสกัดออกมา และการเตรียมการทดสอบก็พร้อม
การตรวจจับกรดนิวคลีอิกใหม่ของไวรัสโคโรนาใช้เทคโนโลยี RT-PCR เชิงปริมาณเรืองแสงเป็นหลัก ซึ่งเป็นการผสมผสานระหว่างเทคโนโลยี PCR เชิงปริมาณเรืองแสงและเทคโนโลยี RT-PCR ในกระบวนการตรวจจับ จะใช้เทคโนโลยี RT-PCR เพื่อถอดรหัสกรดนิวคลีอิก (RNA) ของไวรัสโคโรนาสายพันธุ์ใหม่ให้เป็นกรดดีออกซีไรโบนิวคลีอิก (DNA) ที่สอดคล้องกัน จากนั้นใช้เทคโนโลยี PCR เชิงปริมาณเรืองแสงเพื่อจำลอง DNA ที่ได้รับในปริมาณมาก ตรวจพบ DNA ที่จำลองแบบและติดป้ายกำกับด้วยเครื่องตรวจทางเพศ หากมีกรดนิวคลีอิกของไวรัสโคโรนาชนิดใหม่ เครื่องมือนี้สามารถตรวจจับสัญญาณฟลูออเรสเซนต์ได้ และในขณะที่ DNA ยังคงทำซ้ำ สัญญาณฟลูออเรสเซนต์ก็จะเพิ่มขึ้นอย่างต่อเนื่อง จึงเป็นการตรวจจับการมีอยู่ของไวรัสโคโรนาสายพันธุ์ใหม่ทางอ้อม
เหตุใดผลลบลวงจึงเกิดขึ้น?
ผลลบลวงหมายความว่าผู้ถูกทดสอบติดเชื้อไวรัสโคโรนาสายพันธุ์ใหม่ แต่ตรวจไม่พบกรดนิวคลีอิกของไวรัส กล่าวคือ ผลตรวจกรดนิวคลีอิกเป็นลบ หากตัวอย่างไม่มีอาการที่เกี่ยวข้องและผลการทดสอบกรดนิวคลีอิกเป็นลบ ก็เป็นเรื่องง่ายที่จะปล่อยให้เขาผ่อนคลายความระมัดระวัง ซึ่งอาจนำไปสู่การแพร่กระจายของไวรัสในวงกว้าง ซึ่งเป็นกลอุบายของไวรัสโคโรนาสายพันธุ์ใหม่
มีสาเหตุหลักสามประการที่ทำให้ผลลบลวง:
ประการแรก ปริมาณกรดนิวคลีอิกของไวรัสโคโรนาสายพันธุ์ใหม่ในตัวอย่างทดสอบดั้งเดิมต่ำเกินไป ซึ่งต่ำกว่าขีดจำกัดล่างของการตรวจพบ ซึ่งเกี่ยวข้องกับประเภทของตัวอย่างที่เก็บและระยะเวลาในการเก็บตัวอย่าง
ประการที่สอง หากบริเวณที่กรดนิวคลีอิกของไวรัสโคโรนาสายพันธุ์ใหม่จับกับหัววัดกลายพันธุ์ อาจส่งผลต่อประสิทธิภาพการจับจับของหัววัดในการตรวจจับ ส่งผลให้เกิดสัญญาณฟลูออเรสเซนต์ที่ตรวจไม่พบ
ประการที่สาม ผลลบลวงยังเกี่ยวข้องกับความไวของเทคโนโลยีการตรวจจับด้วย ในช่วงแรกของการระบาด ชุดทดสอบทางคลินิกยังไม่สุกเพียงพอและความไวของชุดทดสอบไม่สูงพอ และมีรายงานผลลบลวงบ่อยครั้ง ต่อมาด้วยการปรับปรุงระดับเทคนิค อัตราความแม่นยำในการตรวจจับเพิ่มขึ้นอย่างรวดเร็ว และอัตราลบลวงยังคงลดลงอย่างต่อเนื่อง
การทดสอบกรดนิวคลีอิกเชิงบวกเป็นการวินิจฉัยหรือไม่?
ผลการทดสอบกรดนิวคลีอิกที่เป็นบวกสามารถยืนยันการมีอยู่ของกรดนิวคลีอิกของไวรัสในระบบทางเดินหายใจส่วนบนของตัวอย่าง แต่ไม่สามารถวินิจฉัยได้โดยตรงว่าเป็นผู้ป่วยที่เป็นโรคปอดบวมจากหลอดเลือดใหม่ ในกรณีของการทดสอบกรดนิวคลีอิกที่เป็นบวก ผู้รับการทดลองควรได้รับการวินิจฉัยเพิ่มเติมตามประวัติทางระบาดวิทยา ประวัติการติดต่อ ฯลฯ สามารถวินิจฉัยเป็นกรณีที่ได้รับการยืนยันได้
หากตัวอย่างไม่มีอาการที่เกี่ยวข้อง โดยทั่วไปจะได้รับการวินิจฉัยว่าเป็นการติดเชื้อที่ไม่มีอาการ การติดเชื้อที่ไม่มีอาการก็ติดต่อได้เช่นกัน และการติดเชื้อที่ไม่แสดงอาการบางรายก็เริ่มแสดงอาการและได้รับการยืนยันว่าเป็นผู้ป่วยแล้ว
เทคโนโลยีอื่น ๆ เพื่อตรวจจับโคโรนาไวรัสสายพันธุ์ใหม่
สำหรับผู้รับการทดลอง การแยกไวรัสออกจากสิ่งส่งตรวจถือเป็นพื้นฐานที่เชื่อถือได้มากที่สุดสำหรับการวินิจฉัย อย่างไรก็ตาม การแยกเชื้อไวรัสเป็นการผ่าตัดที่ค่อนข้างอันตราย ซึ่งจำเป็นต้องดำเนินการในห้องปฏิบัติการที่มีการป้องกันในระดับสูง และใช้เวลานานและมีค่าใช้จ่ายสูง - สถานพยาบาลทั่วไปไม่มีอาการนี้ ส่วนใหญ่จะใช้วิธีการตรวจดูว่ามีแอนติบอดี้ไวรัสในเลือดหรือไม่เพื่อตรวจสอบว่าผู้รับการทดลองติดไวรัสหรือไม่ โรคตับอักเสบบี โรคเอดส์ ฯลฯ ได้รับการทดสอบด้วยวิธีนี้
ไวรัสโคโรน่าสายพันธุ์ใหม่สามารถตรวจพบได้ด้วยวิธีการตรวจจับทางภูมิคุ้มกันนี้ เมื่อเผชิญกับการบุกรุกของไวรัสโคโรนาสายพันธุ์ใหม่ ร่างกายมนุษย์จะ "ต่อต้าน" และผลิตแอนติบอดีจำเพาะ IgM และ IgG (อิมมูโนโกลบูลิน M และอิมมูโนโกลบูลิน G) หากตรวจพบแอนติบอดีจำเพาะทั้งสองนี้ในเลือดของผู้ถูกทดสอบ ก็สามารถบ่งชี้ได้ว่าผู้ถูกทดสอบติดเชื้อไวรัสโคโรนาสายพันธุ์ใหม่
วิธีการตรวจหาแอนติบอดี? วิธีที่ใช้กันทั่วไปคือ chemiluminescence immunoassay นั่นคือการใช้รีเอเจนต์เคมีเรืองแสงหรือเอนไซม์เฉพาะเพื่อติดฉลากแอนติบอดีหรือแอนติเจน การก่อตัวของสารเชิงซ้อนโดยปฏิกิริยาภูมิคุ้มกัน จากนั้นจึงเติมรีเอเจนต์เรืองแสงหลังการล้าง แอนติบอดีจำเพาะสายพันธุ์ เครื่องมือเคมีเรืองแสงสามารถตรวจจับสัญญาณเรืองแสงได้ เคมีเรืองแสงอิมมูโนแอสเสย์นี้เป็นหนึ่งในเทคนิคอิมมูโนแอสเสย์ที่ทันสมัยที่สุดในปัจจุบัน มีความไวสูง ความจำเพาะเจาะจงสูง ช่วงการตรวจจับที่กว้าง และผลลัพธ์ที่รวดเร็ว แต่ค่าใช้จ่ายในการตรวจจับสูง
นอกจากนี้ เนื่องจากร่างกายมนุษย์ต้องใช้เวลาระยะหนึ่งในการผลิตแอนติบอดีหลังจากติดเชื้อไวรัส จึงสามารถตรวจพบได้หลังจากผลิตแอนติบอดีแล้วเท่านั้น ซึ่งยังนำไปสู่การตรวจหาแอนติบอดีได้ไม่ทันเวลาอีกด้วย หลังจากการติดเชื้อ เช่น ไวรัสตับอักเสบบี และเอดส์ ใช้เวลา 2 ถึง 3 สัปดาห์ในการผลิตแอนติบอดี ใช้เวลามากกว่า 3 วันในการตรวจหาแอนติบอดี IgM และใช้เวลานานกว่าหนึ่งสัปดาห์ในการตรวจหาแอนติบอดี IgG หลังจากการติดเชื้อโคโรนาไวรัสสายพันธุ์ใหม่
ดังนั้นเพื่อที่จะจับหางของไวรัสโคโรนาสายพันธุ์ใหม่ได้โดยเร็วที่สุด จึงมีการใช้การตรวจจับกรดนิวคลีอิกมากขึ้น ซึ่งสามารถตรวจจับร่องรอยของไวรัสโคโรนาสายพันธุ์ใหม่ได้เร็วกว่าปกติ
